动物组织的取材

1 灌注固定

有条件尽可能活体灌注固定。先腹腔注射巴比妥酸盐麻痹实验动物（如巴比妥钠，20-30mg/kg），打开腹腔，由腹主动脉插入针管，在肝脏附近切开一处静脉，启动蠕动泵开始灌注。先灌注PBS冲洗血液（37°C，体积约1.5倍血液体积，200g大鼠约需要10ml），可以在PBS内加入抗凝血剂防止血液凝固，然后灌注固定液（先37°C，再4°C），持续5-10分钟。另一种灌注方法通过左心室，这种方法需要打开胸腔，动物呼吸停止，针管由左心室插入升主动脉，剪开右心耳，随后的步骤与上述灌注一样。这种方法在胸腔打开后呼吸会立即停止，要求操作者尽快进行后续操作，另外，向心脏插针管比向腹主动脉插针管要简单些，特别是对于一些很小的实验动物。灌注后取出组织，切成1mm见方小块，再后用相同固定液固定30-60分钟左右。

2 活检或直接取样固定

血管不发达的组织，快速活体取材后立即投入固定液，同样，活检样品也要立即投入固定液，然后再尽快切成小块。方法如下：麻醉或断头急性处死，解剖出所需器官，用解剖剪刀剪取一小块组织，放在干净的纸板上，滴一滴冷却的固定液，用新的、无油污锋利的（双面）刀片将材料切成大约1mm宽，2~3mm长的小块，再将其切成1 mm3的小块，取材要尽量快速准确。如果有方向要求，如一些空腔器官、皮肤、角膜等，要注意方向性，保证需要观察的部位准确取到。最后用牙签将这些小块逐一放入盛有冷的新鲜固定液的有盖青霉素小瓶里，放入冰箱冷藏室低温固定（4 °C）过夜。尽快送中心实验室进行处理。